您的位置:首页>教育要闻>

UMassChan的研究探索了AAV载体制造的差异显示出明显的方法赢家

UMassChan医学院 Horae 基因治疗中心的一篇论文可能会解决关于如何最好地制造用于基因治疗的腺相关病毒 (AAV) 载体的长期争论。该论文在线发表在《人类基因治疗》杂志上,描述了使用 AAV 基因组群体测序 (AAV-GPseq) 来探索由两个常见生产管道生产的载体的基因组。一种是基于人肾细胞的;另一个关于昆虫细胞。一种方法显然是赢家。

“我在 Horae 基因治疗中心的同事使用了一种复杂的下一代测序方法来创建以前无法实现的载体基因组表征的详细程度,这表明在这项研究中有一个不折不扣的赢家:产生的载体TH Chan 医学院院长、麻省大学陈氏医学院教务长兼常务副校长Terence R. Flotte 医学博士说。“在我看来,昆虫细胞载体中基因组片段和未解析的末端重复序列的百分比高得令人无法接受。这是一项重要的工作,应该会影响该领域。”

该研究的通讯作者、微生物学和生理系统助理教授 Phillip WL Tai 博士说:“腺相关病毒载体一直处于基因治疗有效和安全平台的前沿。在这里,我们描述了使用下一代测序方法量化载体基因组异质性的新方法,并且我们能够证明不同的生产平台会产生不同类型和丰度的非单位长度基因组。这些发现表明,关于如何生产安全有效的基因治疗载体还有很多需要学习的地方。尽管这些类型的生物疗法前景广阔,但质量控制管道新技术的开发对于确保突破性药物的安全性至关重要。”

在过去的二十年中,AAV 载体制造在满足临床前和临床试验的大规模生产需求方面取得了显着进步。此外,AAV 载体的安全性和有效性已被广泛研究,世界各地的研究人员在该过程中进行了许多改进,包括用于载体生产的细胞系的选择。但是,空的 AAV 衣壳和含有不完整或不准确的载体基因组的颗粒的存在长期以来一直是一个令人担忧的问题,因为必须精确计算载体中所含治疗材料的剂量。空衣壳或不完整的有效载荷可以改变这些计算。

有几种方法可以将空衣壳与完整颗粒分离,但没有一种技术可以产生不含空衣壳或部分衣壳的载体,并且完整、中间和空衣壳的确切基因组组成在很大程度上仍然未知。

在这项研究中,Tai 博士及其同事使用 AAV-GPseq 测序探索了两种常见生产流程产生的载体基因组的组成:人胚肾细胞中的质粒转染和草地贪夜蛾昆虫细胞中的杆状病毒表达载体。结果表明,源自由昆虫细胞系统制造的相同构建体设计的载体产生的截短和未解析物种的程度高于人类肾细胞生产产生的载体。

“这些令人惊讶的发现为载体功效、安全性以及如何量化和评估临床载体提供了新的思路,”Tai 说

免责声明:本文由用户上传,如有侵权请联系删除!